作者artichoke (summerblue)
看板Biotech
标题Re: [讨论] lysis buffer加下後有需要等半小时吗？
时间Tue Feb 19 21:24:48 2008
※ 引述《LIAR (堕天使)》之铭言：
: 嗯...我们实验室是做neuron的，加lysis buffer後会冰上或冰箱等个30 min再刮
: 下定量，不过我生化的老师认为没这个必要，一加就可以直接噜，而且buffer量不用多，
: 只要刮刀有经过就好，不放心的话收集後冰上泡10 min也就算完全反应.....
: 我比较认同老师的想法，不过想多请教一下意见，如果真的一加就直接刮，我就要
: 把protocol修正一下了。
: =====
: 另外请问一个问题，如果要刮的dish很多，但刮刀不够多，请问刮刀要怎麽重复用
: 而不会交互污染？
正好我今天也在使用lysis buffer，所以手痒来回覆一下您的文章。
我是做pulmonary alveolar macrophage的。
我培养在35mm plate上，
加的lysis buffer量是100μl
放在冰上，大概左右摇晃20-30秒後，
用cell lifter(即刮刀)，完全的刮下来。
最後，
我是两枝cell lifter轮流交替使用。
我把它们泡在内含400ml sDW的1000ml大烧杯内，轮流使用。
据本实验室众多学长姐的经验，是没有交互污染的问题存在。
以上，仅供您参考。
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1F：推 LIAR:请问sDW全名是什麽？ 02/19 21:27
2F：→ artichoke:sterile distilled water 02/19 22:02
3F：推 tincta:我们家是以75% EtoH喷洗之後拭乾再用 03/08 00:36
4F：→ tincta:我是说刮刀 ^^ 03/08 00:37