※ 引述《hsd0 ()》之銘言： : ※ 引述《umbrally (成長)》之銘言： : : 我要分離小片段的DNA(約六百多bp) : : 使用洋菜膠跑電泳來分離 : : 之前使用的是 1%或1.4%的濃度 : : 用17V跑大約18個小時 : : 但是 當把band切下來純化出DNA後 : : 再去跑電泳測試純不純時 往往都不乾淨 : : 於是就要再純化個第二次第三次 : : 到最後東西都沒了~~~~~ : : 所以想請教一下 這種小片段的DNA : : 用多少濃度的gel 多小的電壓 : : 可以較容易分離到呢???謝謝 : 能不能稍微一下這個600多bp的DNA是什麼之後的product呢?! : 因為其實不太懂您所說的"不乾淨"是什麼意思 : 是指做完純化之後check會有其他的band嗎?? : 還有我想請問一下你跑的是多大片的膠呢 是普通像是名片的寬度的gel嗎?? : 因為聽你說用17V跑感覺上不像是一般實驗室那種只有50V或是100V的規格 這個片段是原本接在puc18上 用限制酵素切出這個片段之後 用11cm*14cm 的膠 17V跑 然後照膠的時候看起來我要的片段已經和puc18分開 所以可以把我要的片段的那條band切下來 之後純化 可是純化完 再取一點點去測試純不純 就會發現上面還有其他的band 就是我說的不乾淨 於是就還要再去跑膠 再去切band 純化 重複好幾次check看起來才會是很乾淨的單band 但是這樣 濃度就變的很低 不太夠 --

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