※ 引述《hsd0 ()》之铭言： : ※ 引述《umbrally (成长)》之铭言： : : 我要分离小片段的DNA(约六百多bp) : : 使用洋菜胶跑电泳来分离 : : 之前使用的是 1%或1.4%的浓度 : : 用17V跑大约18个小时 : : 但是 当把band切下来纯化出DNA後 : : 再去跑电泳测试纯不纯时 往往都不乾净 : : 於是就要再纯化个第二次第三次 : : 到最後东西都没了~~~~~ : : 所以想请教一下 这种小片段的DNA : : 用多少浓度的gel 多小的电压 : : 可以较容易分离到呢???谢谢 : 能不能稍微一下这个600多bp的DNA是什麽之後的product呢?! : 因为其实不太懂您所说的"不乾净"是什麽意思 : 是指做完纯化之後check会有其他的band吗?? : 还有我想请问一下你跑的是多大片的胶呢 是普通像是名片的宽度的gel吗?? : 因为听你说用17V跑感觉上不像是一般实验室那种只有50V或是100V的规格 这个片段是原本接在puc18上 用限制酵素切出这个片段之後 用11cm*14cm 的胶 17V跑 然後照胶的时候看起来我要的片段已经和puc18分开 所以可以把我要的片段的那条band切下来 之後纯化 可是纯化完 再取一点点去测试纯不纯 就会发现上面还有其他的band 就是我说的不乾净 於是就还要再去跑胶 再去切band 纯化 重复好几次check看起来才会是很乾净的单band 但是这样 浓度就变的很低 不太够 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.52.129