作者artery (酸糖果)
看板Biotech
標題[求救] 有關大量表達蛋白的問題
時間Mon Feb 25 22:46:52 2008
用E.coil來大量表達蛋白
經由超音波破菌
分離supernatant及pellet
而所表達的蛋白可能位在supernatant 或pellet
請問各位高手
假設蛋白表達在pellet，想要讓蛋白轉成表現在supernatant
有什麼方法或技巧？
ps：就我所知就是降低誘導的溫度，但是我試過30,28,16度
但還是沒有成功，不曉得還有什麼該注意的
或是其他小小技巧，請各位高手提供妙計
謝謝！
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◆ From: 122.127.67.200
1F：推 tsubasawolfy:renature? 02/25 22:48
2F：→ artery:renature？ 不好意思我不懂renature後就可以表達出來了？ 02/25 22:53
3F：推 liuse:用urea溶 但protein會denature 02/25 22:58
4F：推 pepepep:換一下表現系統，比如GST fusion的vector， 02/26 02:24
5F：推 bluecsky:換系統也不一定就會變在supernatanrXDDD 02/26 07:06
6F：→ bluecsky:讓他表現少一點..應該有機會..然後再用大量culture去純化 02/26 07:07