作者artery (酸糖果)
看板Biotech
标题[求救] 有关大量表达蛋白的问题
时间Mon Feb 25 22:46:52 2008
用E.coil来大量表达蛋白
经由超音波破菌
分离supernatant及pellet
而所表达的蛋白可能位在supernatant 或pellet
请问各位高手
假设蛋白表达在pellet,想要让蛋白转成表现在supernatant
有什麽方法或技巧?
ps:就我所知就是降低诱导的温度,但是我试过30,28,16度
但还是没有成功,不晓得还有什麽该注意的
或是其他小小技巧,请各位高手提供妙计
谢谢!
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◆ From: 122.127.67.200
1F:推 tsubasawolfy:renature? 02/25 22:48
2F:→ artery:renature? 不好意思我不懂renature後就可以表达出来了? 02/25 22:53
3F:推 liuse:用urea溶 但protein会denature 02/25 22:58
4F:推 pepepep:换一下表现系统,比如GST fusion的vector, 02/26 02:24
5F:推 bluecsky:换系统也不一定就会变在supernatanrXDDD 02/26 07:06
6F:→ bluecsky:让他表现少一点..应该有机会..然後再用大量culture去纯化 02/26 07:07