※ 引述《[email protected] ( )》之銘言： : ※ 引述《simonmiho (Bear)》之銘言： : : 沒記錯的話21a是 T7 promotor....應該是要先確定在該 : : host有無表現吧...... 有 Ab 的話就要先試..再去看是不是 : : 用His or GST 主要是便利purify and soluble..... : : 我覺得先改善induction 的condition為主.. : 痾 我最近遇到一個超奇特的問題 : 就是我以前養細胞破蛋白來跑western : 大部分蛋白濃度都是在2~8 micro gram / micro leter : 可是我上次抽出來的那個蛋白 我測濃度的時候 竟然高到嚇人 : 我幾乎稀釋一千倍已經10次了 (意思是我總共稀釋了10的30次方倍) : 我取 1 micro leter細胞蛋白 加上 999 micro leter的 lysis buffer稀釋 : 就這樣連續稀釋總共 稀釋了10次 也就是原蛋白濃度稀釋了 10的30次方倍 : 請問一下各位大大 我是不是哪裡出問題啦 : 因為我protein assay的 od值 都比我standar最高的還亮 : 我真是搞不懂是真的他蛋白濃度就是這麼高 還是我lysis的地方出問題呢 My wild guess is the incompatibility of protein assay with the detergent in your lysis buffer... -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ │ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [128.146.81.50] │ ╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo》 ◣◣◢ ─╯