※ 引述《[email protected] ( )》之铭言： : ※ 引述《simonmiho (Bear)》之铭言： : : 没记错的话21a是 T7 promotor....应该是要先确定在该 : : host有无表现吧...... 有 Ab 的话就要先试..再去看是不是 : : 用His or GST 主要是便利purify and soluble..... : : 我觉得先改善induction 的condition为主.. : 痾 我最近遇到一个超奇特的问题 : 就是我以前养细胞破蛋白来跑western : 大部分蛋白浓度都是在2~8 micro gram / micro leter : 可是我上次抽出来的那个蛋白 我测浓度的时候 竟然高到吓人 : 我几乎稀释一千倍已经10次了 (意思是我总共稀释了10的30次方倍) : 我取 1 micro leter细胞蛋白 加上 999 micro leter的 lysis buffer稀释 : 就这样连续稀释总共 稀释了10次 也就是原蛋白浓度稀释了 10的30次方倍 : 请问一下各位大大 我是不是哪里出问题啦 : 因为我protein assay的 od值 都比我standar最高的还亮 : 我真是搞不懂是真的他蛋白浓度就是这麽高 还是我lysis的地方出问题呢 My wild guess is the incompatibility of protein assay with the detergent in your lysis buffer... -- ╭──── Origin:<不良牛牧场> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ │ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [128.146.81.50] │ ╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免费拨接→电话:40586000→帐号:zoo→密码:zoo》 ◣◣◢ ─╯