※ 引述《[email protected] (迷途小書僮)》之銘言： 我就我知道的部分回答一下好了... 如果有錯請各位大大指正 Q: 我想請教大家，有沒有人知道在 cell passage 過程中，加入 Trypsine 的詳細原理？ 我查了好一陣子，只推測可能和破壞細胞的 adhesion 有關， 同時知道 Trypsine 作用的位置在 Lyesine 和 Argnine 的酸基上， A: Trypsine可以作用的位子你也知道嘛...一般蛋白質都會含有這兩種胺基酸 因此會被Trypsine分解，當然細胞和胞外基質作用的相關蛋白質也會被分解掉。 Q: 目前看到的說明，還有一些是加入EDTA去螯合二價的金屬離子， 但 Trypsine 的原理似乎不是如此……？ A: 細胞和細胞間的interaction是透過cadherin的作用，cadherin和cadherin會透過鈣離子 互相作用，因此trypsine中加入EDTA可以螯合二價的鈣離子，讓細胞和細胞失去彼此的 interaction，而cadherin又可以被trypsine分解 既然cell-matrix 和 cell-cell 的interaction都被壞了細胞便可以順利的被 懸浮起來 在繼代的過程中可以按照比例再種回培養皿中，而這些原本被分解掉的蛋白， 也會隨著時間再度表現回細胞膜上，最終回復到原本的狀態。 不知道這樣有沒有回答到你的問題? -- --

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