※ 引述《[email protected] (迷途小书僮)》之铭言： 我就我知道的部分回答一下好了... 如果有错请各位大大指正 Q: 我想请教大家，有没有人知道在 cell passage 过程中，加入 Trypsine 的详细原理？ 我查了好一阵子，只推测可能和破坏细胞的 adhesion 有关， 同时知道 Trypsine 作用的位置在 Lyesine 和 Argnine 的酸基上， A: Trypsine可以作用的位子你也知道嘛...一般蛋白质都会含有这两种胺基酸 因此会被Trypsine分解，当然细胞和胞外基质作用的相关蛋白质也会被分解掉。 Q: 目前看到的说明，还有一些是加入EDTA去螯合二价的金属离子， 但 Trypsine 的原理似乎不是如此……？ A: 细胞和细胞间的interaction是透过cadherin的作用，cadherin和cadherin会透过钙离子 互相作用，因此trypsine中加入EDTA可以螯合二价的钙离子，让细胞和细胞失去彼此的 interaction，而cadherin又可以被trypsine分解 既然cell-matrix 和 cell-cell 的interaction都被坏了细胞便可以顺利的被 悬浮起来 在继代的过程中可以按照比例再种回培养皿中，而这些原本被分解掉的蛋白， 也会随着时间再度表现回细胞膜上，最终回复到原本的状态。 不知道这样有没有回答到你的问题? -- --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 220.131.228.230 -- 　 /　／ ／　 ＼ヽ 　 |　| ／ ー ー| | 　 |　| | ∩　∩（| ／￣￣￣￣￣￣￣￣￣ 　 |　| |''' ▽ '''|＜











大好き! 　 |　Λ|＼ ＿＿／|/ ＼＿＿＿＿＿＿ 　 |　| |/ / <V> i ￣￣￣ -- ┌┼ Origin: 国立中兴大学˙中兴生科 bbs.life.nchu.edu.tw └┘ Author: ketalo 从 219-84-187-31-adsl-tai.dynamic.so-net.net.tw 发表