作者yukilee (yuki)
看板Biotech
標題[求救] pcr的問題
時間Wed Mar 19 23:56:03 2008
我的template是血液的DNA
所有反應條件都一樣
跑膠出來以前都很漂亮的只有一條band
可是現在就莫名其妙的變成2條band
有試過拿回之前做出來只有1條band的DNA來重做
還是一樣變成2條band
negative control沒汙染
重新order過primer 結果還是一樣
dNTP buffer taq 做別的基因都沒問題(也換新過)
也換過別台機器 還是一樣
也重測過反應條件(加DMSO/MgCl2 重跑gradient)
還是不會像以前那樣只有1條band的結果
到底問題出在那裏呢?
連學姊都說超出他的能力範圍
請問有沒有高手指點指點呢?
感激不盡!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.127.202.117
1F：推 jsi:現在膠的%以及跑膠的時間長短跟以前一樣嗎? 03/20 00:52
2F：推 tin0101:兩條大小各是多少!? 03/20 09:41
3F：推 enisx:有圖嘛?? 03/20 10:10
4F：→ yukilee:膠%都一樣 要的大小為300bp 300(<500)的上面會多出一條 03/20 11:07
5F：→ yukilee:調高溫度後>500的地方就會有一條(明顯)及其他淡淡的雜band 03/20 11:10
6F：→ yukilee:沒有存到圖檔欸......=.=""" 03/20 11:12
7F：推 jsi:template DNA放多少量去跑呢? 03/20 22:48
8F：→ yukilee:一樣都只加1ul.... 03/21 10:30
9F：推 shil:那template量多少？ng 且跟之前的是同一批嗎 03/22 01:24