作者yukilee (yuki)
看板Biotech
标题[求救] pcr的问题
时间Wed Mar 19 23:56:03 2008
我的template是血液的DNA
所有反应条件都一样
跑胶出来以前都很漂亮的只有一条band
可是现在就莫名其妙的变成2条band
有试过拿回之前做出来只有1条band的DNA来重做
还是一样变成2条band
negative control没污染
重新order过primer 结果还是一样
dNTP buffer taq 做别的基因都没问题(也换新过)
也换过别台机器 还是一样
也重测过反应条件(加DMSO/MgCl2 重跑gradient)
还是不会像以前那样只有1条band的结果
到底问题出在那里呢?
连学姊都说超出他的能力范围
请问有没有高手指点指点呢?
感激不尽!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.127.202.117
1F：推 jsi:现在胶的%以及跑胶的时间长短跟以前一样吗? 03/20 00:52
2F：推 tin0101:两条大小各是多少!? 03/20 09:41
3F：推 enisx:有图嘛?? 03/20 10:10
4F：→ yukilee:胶%都一样 要的大小为300bp 300(<500)的上面会多出一条 03/20 11:07
5F：→ yukilee:调高温度後>500的地方就会有一条(明显)及其他淡淡的杂band 03/20 11:10
6F：→ yukilee:没有存到图档欸......=.=""" 03/20 11:12
7F：推 jsi:template DNA放多少量去跑呢? 03/20 22:48
8F：→ yukilee:一样都只加1ul.... 03/21 10:30
9F：推 shil:那template量多少？ng 且跟之前的是同一批吗 03/22 01:24