其實我沒有像您學長說的那樣做。 不過我們fix的reagent是cold MeOH， 而且我是一邊vortex(5~6)一邊"直接滴到細胞"的溶液，並沒有延著管壁。 在顯微鏡下觀察時， 細胞收下來前看， 如果飄的細胞很多，才會有細胞碎片從flow的data看到 如果細胞都貼得很好例如control組，幾乎很難看到碎片 所以我覺得細胞破片多，主要還是細胞的condition有問題耶o_o 參考一下...我的經驗啦^^a" ※ 引述《kakaman (日子過的真快阿)》之銘言： : ※ 引述《lausDeo (絕種的白色軟糖)》之銘言： : : 最近開始做cell cycle : : 然後用flow看cell cycle情形 : : 不過遇到一些問題 : : 就是說flow看的結果是細胞都變成破片了 : : 但在6-well細胞還沒passage起來前用顯微鏡看存活的細胞還算滿多的 : : 明顯是後來的處理使細胞破碎 : : 我想問的是這個步驟：滴入酒精以固定細胞 : : 這個時候滴70%酒精有必要"沿著管壁"一滴一滴滴嗎？ : : 還是可以直接滴到細胞沒有關係呢？ : : 還有這時候滴酒精的速度大概是要多慢才算可以呀？ : : 這時候手都好酸... : : 感謝回答囉 : 學長教我的做法是 : 以70%冰酒精延著管壁滴 : 一次兩三滴 接著用手shaking一下 然後繼續滴酒精 : 不要直接滴到細胞 學長說這樣子效果比較不好 : 如果怕手酸 可以把離心管放在vortex那台機器上 : vortex的速度要調慢 延著管壁一次滴一滴 : 以上是一點經驗談 我上禮拜也是第一次跑flow : 加油~~ -- * .. * ） . . . ﹏ *﹏ ∣ * ﹏﹏ * ﹏ 朵朵的浪花 隨著風的旋律悸動著 ． .． . ．. ﹏◥▇█◤ \● ﹏ 遠方的黑暗 彷彿是一場夢的開始 ．ˍˍ． ═╦═╦═╦█\╦═╦ 孤獨的夜裡 細細想著自己的瑣事 █ \● ﹋║﹏║﹏║|| ║ ║﹋ 那是一種微薰而未醉的感覺...... █﹥ http://www.wretch.cc/blog/popopon by Popopon /| --

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