其实我没有像您学长说的那样做。 不过我们fix的reagent是cold MeOH， 而且我是一边vortex(5~6)一边"直接滴到细胞"的溶液，并没有延着管壁。 在显微镜下观察时， 细胞收下来前看， 如果飘的细胞很多，才会有细胞碎片从flow的data看到 如果细胞都贴得很好例如control组，几乎很难看到碎片 所以我觉得细胞破片多，主要还是细胞的condition有问题耶o_o 参考一下...我的经验啦^^a" ※ 引述《kakaman (日子过的真快阿)》之铭言： : ※ 引述《lausDeo (绝种的白色软糖)》之铭言： : : 最近开始做cell cycle : : 然後用flow看cell cycle情形 : : 不过遇到一些问题 : : 就是说flow看的结果是细胞都变成破片了 : : 但在6-well细胞还没passage起来前用显微镜看存活的细胞还算满多的 : : 明显是後来的处理使细胞破碎 : : 我想问的是这个步骤：滴入酒精以固定细胞 : : 这个时候滴70%酒精有必要"沿着管壁"一滴一滴滴吗？ : : 还是可以直接滴到细胞没有关系呢？ : : 还有这时候滴酒精的速度大概是要多慢才算可以呀？ : : 这时候手都好酸... : : 感谢回答罗 : 学长教我的做法是 : 以70%冰酒精延着管壁滴 : 一次两三滴 接着用手shaking一下 然後继续滴酒精 : 不要直接滴到细胞 学长说这样子效果比较不好 : 如果怕手酸 可以把离心管放在vortex那台机器上 : vortex的速度要调慢 延着管壁一次滴一滴 : 以上是一点经验谈 我上礼拜也是第一次跑flow : 加油~~ -- * .. * ） . . . ﹏ *﹏ ∣ * ﹏﹏ * ﹏ 朵朵的浪花 随着风的旋律悸动着 ． .． . ．. ﹏◥▇█◤ \● ﹏ 远方的黑暗 彷佛是一场梦的开始 ．ˍˍ． ═╦═╦═╦█\╦═╦ 孤独的夜里 细细想着自己的琐事 █ \● ﹋║﹏║﹏║|| ║ ║﹋ 那是一种微薰而未醉的感觉...... █﹥ http://www.wretch.cc/blog/popopon by Popopon /| --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.177.238