※ 引述《aspiren (希望vs.期望vs.盼望)》之銘言： : 最近開始接觸HPLC的實驗 : 遇到了一個問題... : 情況為: A物質濃度為2ng/uL, 我的注射量為 1uL....>有明顯的peak跑出來 有明顯的peak跑出來 依您說的意思 我的理解 應是peak不高 : 後來因為其他的考量, 老師跟我說進去的量稱為 column mass : 即如上 2ng/nL, inject 1uL, 則total分析的量為 2ng ^^^^^^^^ 兩次的似乎不一樣 : 後來因為其他因素考量必須注射量修改為 5uL : 所以我就配致了0.4ng/uL的濃度, 注射 5uL : 但結果就是一直跑不出peak : 所以想請問有可能是什麼原因? : 請大家不吝指教 : 謝謝 注射 1uL 您用的是一般LC還是快速分析型的LC?? 個人覺得 有可能是注射量的關係 當注射量拉大 在管柱裡的色帶也相對拉大 再加上多少會在管柱裡擴散 可能使峰變寬許多 再加上原本的peak就小 峰一變寬就很難與雜訊判別了 尤其您的量又不高 以一般LC來說 這個量有時已經是定量極限了 另 如果是快速分析型的LC 因為管徑小 填充密 有時不能打太大量進去 太大量可能會有雙峰 且峰較寬的問題 個人建議 您先把濃度拉高 打1uL 再接著打一次5uL 比較兩次的峰寬 若差異太大 就要注意了 另外 如果是快速分析型的 又要看用哪台... 若是waters家的UPLC 試著更換weak wash為溶解sample的溶劑 以上若有錯請先進指教 --

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