※ 引述《aspiren (希望vs.期望vs.盼望)》之铭言： : 最近开始接触HPLC的实验 : 遇到了一个问题... : 情况为: A物质浓度为2ng/uL, 我的注射量为 1uL....>有明显的peak跑出来 有明显的peak跑出来 依您说的意思 我的理解 应是peak不高 : 後来因为其他的考量, 老师跟我说进去的量称为 column mass : 即如上 2ng/nL, inject 1uL, 则total分析的量为 2ng ^^^^^^^^ 两次的似乎不一样 : 後来因为其他因素考量必须注射量修改为 5uL : 所以我就配致了0.4ng/uL的浓度, 注射 5uL : 但结果就是一直跑不出peak : 所以想请问有可能是什麽原因? : 请大家不吝指教 : 谢谢 注射 1uL 您用的是一般LC还是快速分析型的LC?? 个人觉得 有可能是注射量的关系 当注射量拉大 在管柱里的色带也相对拉大 再加上多少会在管柱里扩散 可能使峰变宽许多 再加上原本的peak就小 峰一变宽就很难与杂讯判别了 尤其您的量又不高 以一般LC来说 这个量有时已经是定量极限了 另 如果是快速分析型的LC 因为管径小 填充密 有时不能打太大量进去 太大量可能会有双峰 且峰较宽的问题 个人建议 您先把浓度拉高 打1uL 再接着打一次5uL 比较两次的峰宽 若差异太大 就要注意了 另外 如果是快速分析型的 又要看用哪台... 若是waters家的UPLC 试着更换weak wash为溶解sample的溶剂 以上若有错请先进指教 --

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