作者HPLC (高效能液相層析儀)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC 沖提液問題
時間Fri Sep 3 13:06:35 2010
各位大大好
HPLC小弟我來問HPLC問題了= ="
最近我找到一篇paper
他上面的沖提液為
methanol:water:acetic acid(20:80:1.0 ,v/v)
流速為1 mL/min
可是沖提液加起來不是100%耶
那我要怎麼去用呢?
而且我還有一個問題
水的成分這麼高
他會不會傷column嗎?
感謝各位大大的解答~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.17.15.25
1F：推 yonlin:這是體積比....不用一百沒問題阿... 09/03 14:08
2F：推 shiaobau:超過100沒差啊 例如200mL:800mL:10mL這樣配... 09/03 14:48
3F：→ shiaobau:另外..RP的管柱 水用很高不會傷啊.反而用低極性solven 09/03 14:49
4F：→ shiaobau:才比較傷..還有pH值等等.. 09/03 14:49
5F：推 yhy:比例超過100沒差阿 按照比例配就好 至於水,我還跑過100%的磷 09/03 15:06
6F：→ yhy:酸水的移動相 其實好像是過鹼比較傷管柱 09/03 15:07
7F：推 ls4860:如果你要知道M.P.會不會傷管柱直接看說明書或是懶一點問業 09/03 15:25
8F：→ ls4860:代都可以 目前我用過HILIC的管柱才有比較說明水不要太多 09/03 15:26
9F：推 ls4860:太酸(pH 2)鹼(pH 7.5)也會傷 其他C18, C8, phenyl(waters) 09/03 15:30
10F：→ ls4860:我都沒看到特別說明水不要太多 09/03 15:31
11F：→ HPLC:那我可以濾80:1的水和AA為一罐 然後濾一罐MeOH 以80:20 (水:M 09/03 16:35
12F：→ HPLC:eOH) (v/v) 的單一梯度下去跑嗎? 09/03 16:36
13F：→ HPLC:學姊是說+acetic acid 是為了讓peak更尖 09/03 16:37
14F：推 Silience:我覺得你應該先去確認你的column能不能用才對..... 09/03 16:40
15F：→ Silience:如果column壞了 那後面就精采了..... 09/03 16:41
16F：→ HPLC:column OK 前不久才用過 09/03 16:53
17F：推 Silience:那就上吧...反正比例一般不會差太多的 09/03 18:13
18F：推 HOPEFIRE:這一看就是reverse phase的, 用水沒問題阿 要過膜 09/05 18:26
19F：→ HPLC:可是我們lab有一隻 就是好像水的比例太高 結果沖太久 09/05 20:21
20F：→ HPLC:出來的圖他給你比YA= =" 09/05 20:21
21F：→ HPLC:我突然又有一個問題耶~paper說的加醋酸~有分等級嗎= =? 09/06 09:30
22F：→ HPLC:paper沒寫他用甚麼等級的 09/06 09:45
23F：→ kanjiya:用試藥級的醋酸 用很久都沒事 應該OK 09/06 17:05
24F：推 iori23041114:抱歉我不是很了解，原po為什麼要濾兩罐動相呢？ 09/09 10:56
25F：→ iori23041114:看你寫的感覺是用Isocratic沒錯吧？應該一罐就能搞定 09/09 11:01
26F：→ iori23041114:另外管柱的部分，管柱有說明書，看一下他的pH值範圍 09/09 11:03
27F：→ icehawk:如果mobile phase是鹽類的buffer,清洗不乾淨才要擔心 09/14 23:43
28F：→ icehawk:如果是NH2column,就需要注意mobile phase水的比例 09/14 23:54