作者HPLC (高效能液相层析仪)
看板Chemistry
标题[实验] HPLC 冲提液问题
时间Fri Sep 3 13:06:35 2010
各位大大好
HPLC小弟我来问HPLC问题了= ="
最近我找到一篇paper
他上面的冲提液为
methanol:water:acetic acid(20:80:1.0 ,v/v)
流速为1 mL/min
可是冲提液加起来不是100%耶
那我要怎麽去用呢?
而且我还有一个问题
水的成分这麽高
他会不会伤column吗?
感谢各位大大的解答~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.17.15.25
1F：推 yonlin:这是体积比....不用一百没问题阿... 09/03 14:08
2F：推 shiaobau:超过100没差啊 例如200mL:800mL:10mL这样配... 09/03 14:48
3F：→ shiaobau:另外..RP的管柱 水用很高不会伤啊.反而用低极性solven 09/03 14:49
4F：→ shiaobau:才比较伤..还有pH值等等.. 09/03 14:49
5F：推 yhy:比例超过100没差阿 按照比例配就好 至於水,我还跑过100%的磷 09/03 15:06
6F：→ yhy:酸水的移动相 其实好像是过硷比较伤管柱 09/03 15:07
7F：推 ls4860:如果你要知道M.P.会不会伤管柱直接看说明书或是懒一点问业 09/03 15:25
8F：→ ls4860:代都可以 目前我用过HILIC的管柱才有比较说明水不要太多 09/03 15:26
9F：推 ls4860:太酸(pH 2)硷(pH 7.5)也会伤 其他C18, C8, phenyl(waters) 09/03 15:30
10F：→ ls4860:我都没看到特别说明水不要太多 09/03 15:31
11F：→ HPLC:那我可以滤80:1的水和AA为一罐 然後滤一罐MeOH 以80:20 (水:M 09/03 16:35
12F：→ HPLC:eOH) (v/v) 的单一梯度下去跑吗? 09/03 16:36
13F：→ HPLC:学姊是说+acetic acid 是为了让peak更尖 09/03 16:37
14F：推 Silience:我觉得你应该先去确认你的column能不能用才对..... 09/03 16:40
15F：→ Silience:如果column坏了 那後面就精采了..... 09/03 16:41
16F：→ HPLC:column OK 前不久才用过 09/03 16:53
17F：推 Silience:那就上吧...反正比例一般不会差太多的 09/03 18:13
18F：推 HOPEFIRE:这一看就是reverse phase的, 用水没问题阿 要过膜 09/05 18:26
19F：→ HPLC:可是我们lab有一只 就是好像水的比例太高 结果冲太久 09/05 20:21
20F：→ HPLC:出来的图他给你比YA= =" 09/05 20:21
21F：→ HPLC:我突然又有一个问题耶~paper说的加醋酸~有分等级吗= =? 09/06 09:30
22F：→ HPLC:paper没写他用甚麽等级的 09/06 09:45
23F：→ kanjiya:用试药级的醋酸 用很久都没事 应该OK 09/06 17:05
24F：推 iori23041114:抱歉我不是很了解，原po为什麽要滤两罐动相呢？ 09/09 10:56
25F：→ iori23041114:看你写的感觉是用Isocratic没错吧？应该一罐就能搞定 09/09 11:01
26F：→ iori23041114:另外管柱的部分，管柱有说明书，看一下他的pH值范围 09/09 11:03
27F：→ icehawk:如果mobile phase是盐类的buffer,清洗不乾净才要担心 09/14 23:43
28F：→ icehawk:如果是NH2column,就需要注意mobile phase水的比例 09/14 23:54