作者tauzi (tauzi)
看板Chemistry
標題[實驗] 萃取與HPLC分析
時間Wed Nov 10 00:16:41 2010
小妹是生科的，想請教一些基礎問題
目前手邊有一些植物萃取物粉末(不知比例的乙醇萃出來的)
主要想是要分出裡面某些主要可以治療疾病的成分(不一定要做到單一compound)
我一開始想說用不同極性去分 所以分別用了水、EA以及正己烷做液液萃取
接著我把3個部份的產物 做生物試驗 發現我要的在EA layer
接著老師說可以像藥廠做QC一樣 用HPLC分析其內容物
於是我將EA layer 跟手邊的萃取物粉末 回溶於 乙醇
用不同比例的甲醇加ACN 做動相 下去跑
可是出來的patten是一模一樣的
是我用得動相不對嗎? 所以拉不出其他東西嗎?
還是有其他原因呢?
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.205.70
1F：推 YuChHa:不能直接跑 Mass 嗎? 11/10 01:03
2F：→ tauzi:我們這沒有Mass可以跑... 11/10 09:44
3F：→ cheating:MeOH:ACN的比例更動或是換成其他移動相試試看 11/10 09:45
4F：→ cheating:不然就是你的乙醇抽出物跟你的EA抽出物內含物大同小異 11/10 09:46
我是用乙醇抽取物回溶於水中再用EA.正己烷抽取(而剩下的水層和正己烷層都有東西)
5F：推 dk191726:HPLC偵測器是..? 11/10 10:22
偵測器是DAD (diode array detector)
6F：推 ls4860:UV嘛 你有先去掃過全光譜 看看在哪幾個地方有吸收峰嘛 11/10 10:29
我在偵測的時候是直接掃全波長(200nm~700nm)
※ 編輯: tauzi 來自: 140.114.96.99 (11/10 11:15)
7F：推 shiaobau:EA層 用NP的管柱跑跑看吧 個人覺得 甲醇:乙腈 EA出來的 11/10 11:18
8F：→ shiaobau:東西 最前面就出來了 11/10 11:19
9F：→ shiaobau:不然先點點TLC吧 用hex:EA的展開液 水那邊東西應該較少 11/10 11:31
我有先點過TLC 我用90%EA+10%MeOH展開
乙醇抽取物回溶的點拉不開
EA抽取物則是兩點 一點跑很快 一點下面還有一群尾巴脫很長的
但在HPLC中的 乙醇及EA抽取物都是 兩群peak 極性明顯有差異
※ 編輯: tauzi 來自: 140.114.96.99 (11/10 12:19)
10F：推 SureWinmouse:清大生科院有做萃取的老師? 11/10 13:52
11F：→ tauzi:就只又我QQ 11/10 17:06
12F：推 iori23041114:管柱呢？都沒提到管柱的材質。 11/11 08:55
13F：→ tauzi:就只是一般RP用的C18 11/11 10:09