作者tauzi (tauzi)
看板Chemistry
标题[实验] 萃取与HPLC分析
时间Wed Nov 10 00:16:41 2010
小妹是生科的，想请教一些基础问题
目前手边有一些植物萃取物粉末(不知比例的乙醇萃出来的)
主要想是要分出里面某些主要可以治疗疾病的成分(不一定要做到单一compound)
我一开始想说用不同极性去分 所以分别用了水、EA以及正己烷做液液萃取
接着我把3个部份的产物 做生物试验 发现我要的在EA layer
接着老师说可以像药厂做QC一样 用HPLC分析其内容物
於是我将EA layer 跟手边的萃取物粉末 回溶於 乙醇
用不同比例的甲醇加ACN 做动相 下去跑
可是出来的patten是一模一样的
是我用得动相不对吗? 所以拉不出其他东西吗?
还是有其他原因呢?
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.205.70
1F：推 YuChHa:不能直接跑 Mass 吗? 11/10 01:03
2F：→ tauzi:我们这没有Mass可以跑... 11/10 09:44
3F：→ cheating:MeOH:ACN的比例更动或是换成其他移动相试试看 11/10 09:45
4F：→ cheating:不然就是你的乙醇抽出物跟你的EA抽出物内含物大同小异 11/10 09:46
我是用乙醇抽取物回溶於水中再用EA.正己烷抽取(而剩下的水层和正己烷层都有东西)
5F：推 dk191726:HPLC侦测器是..? 11/10 10:22
侦测器是DAD (diode array detector)
6F：推 ls4860:UV嘛 你有先去扫过全光谱 看看在哪几个地方有吸收峰嘛 11/10 10:29
我在侦测的时候是直接扫全波长(200nm~700nm)
※ 编辑: tauzi 来自: 140.114.96.99 (11/10 11:15)
7F：推 shiaobau:EA层 用NP的管柱跑跑看吧 个人觉得 甲醇:乙腈 EA出来的 11/10 11:18
8F：→ shiaobau:东西 最前面就出来了 11/10 11:19
9F：→ shiaobau:不然先点点TLC吧 用hex:EA的展开液 水那边东西应该较少 11/10 11:31
我有先点过TLC 我用90%EA+10%MeOH展开
乙醇抽取物回溶的点拉不开
EA抽取物则是两点 一点跑很快 一点下面还有一群尾巴脱很长的
但在HPLC中的 乙醇及EA抽取物都是 两群peak 极性明显有差异
※ 编辑: tauzi 来自: 140.114.96.99 (11/10 12:19)
10F：推 SureWinmouse:清大生科院有做萃取的老师? 11/10 13:52
11F：→ tauzi:就只又我QQ 11/10 17:06
12F：推 iori23041114:管柱呢？都没提到管柱的材质。 11/11 08:55
13F：→ tauzi:就只是一般RP用的C18 11/11 10:09