看板Biology
标 题Re: 请问有关PCR的疑惑?
发信站KKCITY (Wed Jul 19 22:19:22 2006)
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※ 引述《buterscotch ( )》之铭言:
> ※ 引述《ougiyasu (无聊不要找我聊天>.<)》之铭言:
> > 我这几天做PCR 将sample稀释十倍
> > P出来的结果很怪 我的sample没有bands
> > 但是negative control却有band
> 我感觉你的negative control的band可能是primer dimer
> 请问是不是大约50-70bp的band呢?
大约在300bp的位置 所以我觉得应该不是primer dimer...
> 另外你的sample没有band的理由可能是template的浓度还是太高
我是怀疑会不会浓度太低 因为positive control是学长的RNA
他萃出来的浓度更高 所以经过转录和放大应该还是比我的多
不过ㄧ般好像都是浓度过多才过P不出来
浓度被稀释後通常都会P出来......
所以这一点我一直想不出来有可以解释的地方
> 请问现在的浓度是多少呢?
> 如果template太多
> 这种情况下primer跟dNTP在最早的round就用光了
> 如果更稀释之後应该就会出现band
> 另外就是可以把PCR product拿1 ul出来
> 当作template在做一次PCR
> > ㄧ般如果是污染了 我的sample也应该要有band的阿
> > 这样的结果不知道有没有可以解释的地方???
> 希望有帮到你
> 祝你好运
感谢你喔~~~~~有这样热心的版友真好
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鱼说:你看不见我的泪水,因为我在水中...
水说:我能感觉到你的泪,只因你在我的心中。
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