看板Biology
标 题Re: 板上有没有人在作electroporation的?
发信站KKCITY (Mon Mar 12 20:58:19 2007)
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※ 引述《[email protected] (燃烧我的小宇宙)》之铭言:
> 最近要试一种新的转染细胞方法,
> 我使用的是电穿孔(electroporation),
> 但是做了几次也查过相关资料,
> 细胞不是死一堆就是DNA给我进不去,
> 如果一直没办法的话,
> 我可能还是会改成用Lipofectamine作实验吧....= =
> 我使用的是293T这株细胞,
> 不晓得板上有没有同学是在做这方面的?
> 可以提供小弟一点建议,
> 谢谢罗~
293T??
这是一株超级容易把DNA送进去的细胞
即便是用CaPO4都能达到至少在50-60%以上的transfection efficiency
为什麽还要用electroporation?
若是仍然要使用electroporation
建议可以试试用不同的细胞数跟DNA量
我是用hMSCs, 我是从50万颗细胞到200万颗
DNA量是从10ug到100 ug, 後来发现100万颗细胞/50ug DNA是最好的condition
当然还要调electroporator current/duration
我不知道您的是哪一家厂牌的
不过一般说明书都会有建议用什麽样的current/duration
试试看吧~~
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