作者jadam62 (洵)
看板Biology
标题[问题] FISH Cy3萤光问题
时间Sun Jun 20 15:01:33 2010
【问题】：杂合後发出的萤光不同以往
【问题起因】：学长毕业後
【个人看法】：是否是probe出问题
各位先进大家好
我是刚接触FISH这个技术的学生
我并没有这方面的相关背景
对於萤光Probe不是很了解
有些问题想请教各位
以下有相关的资讯提供各位做回复
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当我的Probe在刚送来的时候
按照学长的SOP做
在显微镜底下是可以看得很清楚
而Probe所携带的Cy3萤光也是像其他学者杂出来的"暗红色"
距离现在该Probe大概有放置1年了
我使用该Probe所杂合出来的细胞体是呈现"橘色"
而且并不是每个菌体都被明显杂合到
我这里所指的"明显"并不是专一性的问题
而是感觉杂了一半，有颜色又好像没有
而且以往杂合DAPI视野下因该是每个细胞体都有"蓝光"
可是近来的实验结果DAPI视野下会有一些细胞体呈现"亮黄光"
还恳请各位先进提供意见
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如果是关於做法部分
我没有擅自改变学长的SOP
硬体的部分的话
我有请萤光显微镜厂商的工程师来帮我看过仪器
他跟我说基本上仪器是没有大问题
也看过滤光片
大致上是这样
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.134.64.73
1F：推 vixen:光只染DAPI时你的细胞核颜色是正确的蓝光吗? 06/20 23:51
2F：推 jack33:想请问你的probe放多久了? 07/03 16:09
3F：→ jack33:不知有没有可能放太久有点decay了? 07/03 16:10