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标 题Re: 请问 Yeast 2 hybrid 酵母菌筛选的流程是怎样?
发信站热带鱼天堂 (Wed Mar 15 18:14:32 2006)
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※ 引述《Legolas (游侠--戒灵)》之铭言：
: 假设质体都已经送到yeast里去培养了
: 而 pAS2-1质体有 GAL4 BD, Trp
: pACT2质体有 GAL4 AD, Leu
: 用SD筛选,
: 好像要筛选两次...
: 流程是如何? 小问题 希望不吝回答 感谢您!!
1.第一次筛 准备二个SD plate
一个缺Trp 一个缺Leu
Plating
pAS2-1----->-Trp
pACT-2----->-Leu
2.培养三天 摄氏３７度
3.在准备一个缺Trp,Leu的plate
在-Trp,Leu SD plate上mating
分别沾single colony shreaking 别沾太多也别沾太少
太多三天後分不清死细胞跟活细胞 太少也会长不出来
4.培养三天 摄氏３７度
5.观察有无single colony产生
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