作者ghjkl (黄宝臻黄宝臻黄宝臻)
看板Biotech
标题Re: [请问]细胞污染要如何处理??
时间Tue May 9 23:46:47 2006
※ 引述《jingner (jingner)》之铭言:
: 我直接过来这里问了^^""
: 打散离心可能是一种方法
: 不过我还想问
: 我家用的是RPMI+PS+FBS
: 那有没有实验室用的是别种抗生素??
: 补充一下
: 如果我看到爆发後的"污染"
: 是绝不会留下的
: 问题是 在好好的时候 大家来看都觉得它是OK的
: 可是我就会觉得它其实有问题 只是菌的population
: 还没到"爆发"的时候
: 於是我只得颤颤兢兢的养 勤换medium
: 可是不敢冻他 所以心理压力很大
: 老师也不太信任我的细胞
: 所以叫我多找找有没有药可以处理
: 谢谢大家帮忙了........(叩谢)
: ※ 引述《apa9394 (apa)》之铭言:
: : 我的细胞是挑了很久的stable clone
: : 解冻後却出现一种现象
: : 就是"污染"
: : 看起来会整盘沙沙的
: : 仔细看有很多长短不一的
: : 应该是细菌还是杆菌之类的东西
: : 而且游动的很快.....Orz
: : 通常都在第三天突然"爆发"
: : 只要在第二天换medium就没事
: : 我的clone还有价puromycin筛选
: : 想请问有没有人知道有药可以处理污染的细胞??
: : 要不然就得重做......Orz
说真的我不认为离心真的可行
因为原po的培养基中应该已经加了抗生素了
所以会爆发出来表示这些细菌已经有抗药性了
离心虽然能将部分的细菌与细胞分离
但是不可能到达百分之百
而细菌的生长速度绝对是细胞的数十倍以上
只是细菌很小所以在量少的时候并不容易被观察到
但并不表示他们被抑制住了
所以建议原po与其花时间是这些不太可能成功的事情还是砍掉重练比较快
至於想用别的抗生素杀菌
这老实说我也试过了
当时我先利用PBS将悬幅的细菌洗掉
洗了三次洗到细胞都变形了
才用trypsin将细胞打下离心之後
在培养的培养基中除了原本的PS之外
我加入了抗霉菌的fungizon 和其他三种抗生素其中包括了万古霉素
剂量是正常使用量的两倍
结果令人失望的
污染还是在两天後就又爆发了
所以真的不建议原po在浪费时间在这上面了
砍掉重练真的比较快
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 220.136.193.124
1F:推 threestars:都是用抑制细胞壁的抗生素吗? 05/10 01:40
2F:→ ghjkl:不是有的是抑制格兰氏阴性菌的抗生素 05/10 17:15