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标 题关於cloning的问题...
发信站批踢踢参 (Wed May 10 04:16:27 2006)
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我的selectable marker是kanamycin...
查阅网路上的一般用量是50ug/ml...
也有人说过...kanamycin很强...所以可以减少用量...
想请问有经验的人, 如果增加用量 (如100ug/ml) 是否可能会杀死所有的菌...
还是可以提高筛选的成功率??
另外, 由於一直clone不到某一基因...(而每一个步骤都蛮确定没有问题...
也都作了各种control)
所以怀疑, 该基因对细菌本身可能有毒性...
请问, 如果真的是如此, 那该怎麽办呢?? 是否就没有机会clone这个基因了??
PS. 目前使用的strain为DH5alpha
先谢过~~:)
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