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标 题Re: [问题] 关於primer-dimer
发信站无名小站 (Wed May 10 19:43:54 2006)
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※ 引述《[email protected] (把贱格的份好好活下去..)》之铭言：
> 就是RT-PCR的产物去跑电泳阿
> 有时会发现最底下会有primer-dimer的存在
> 当dimer较亮时
> 会发现你所要看的表现的band会暗许多
> 情况不一定
> 有时重P会改善..但有时反而更惨
> 要怎样才能避免dimer的出现
> 或是说根本没差不用管他
> 是因为primer太多..所以自己聚合还是
> 根本没夹到你的cDNA或是夹不到
> 我一样是跑35个cycle
> 但是那些cycle所需时间与taq等药品都是照protocol做的
> 我也不是很懂
> 拜托诸位强者了
建议先用电脑软体跑看看会不会出现primer-dimer
然後计算Tm值, 以Tm-5来当annealing temp.
这样试试看吧!
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夫兵者不祥之器物或恶之故有道者不处君子居则贵左用兵则贵右兵者不祥之器非君子
之器不得已而用之恬淡为上胜而不美而美之者是乐杀人夫乐杀人者则不可得志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏将军居左上将军居右言以丧礼处之杀人之众以哀悲泣之战胜以
丧礼处之道常无名朴虽小天下莫能臣侯王若能守之万物将自宾天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦将知止知止可以不殆譬道之在天下140.109.32.9海