磷酸化的蛋白会慢慢不见 所以我都是现抽现跑sds，转到pvdf或nc後会稳一点 我之前会放几天再一起收protein，但效果不好 还有，你那个cell signaling的抗体好像要在4度c作用O/N 我看人家用这只的都是这样，不知他有没有特别建议就是了 还有，他们应该会附postive control给你 你拿过那个试过吗? 之前学姐要是做磷酸化的话 会用到1:500，但我觉的有点伤本 我以前也用cell signaling，但我不爱用，因为要作用o/n 後来换那种一小时就可以的，虽然贵一点点 但因为作用一个小时而已，所以我会用到1:2000 37度c二小时，这样会省一点，给你做参考^^ ※ 引述《tonyroro (孤独存在)》之铭言： : ※ 引述《jedy (想去南极跟企鹅玩!)》之铭言： : : 最近在用这支抗体跑western (是跟cell signaling买的) : : 使用的sample是小鼠的脑组织（cortex hippocampus amgdala) : : 小鼠没做任何实验 就纯粹当control : : 可是我怎麽跑都没有band出来 : : 每次看到一片空白的底片...就很无言 : : 但是我跑total CREB和actin都有band : : 想跟这里有跑这支抗体的人交流一下 : : 我这样是有可能哪里有问题吗 : : 压的时间不够久? (我有压过1个小时 还是没band) : : 先谢谢大家的建议罗 : 你跑的是看磷酸化的抗体 : 所以在lysis cell 抽protein时 : 那个lysis buffer可能成分必须要改一下 : 可能是这样八 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 61.64.162.223