作者winjj (小深蓝)
看板Biotech
标题Re: [问题]有关cloning 选用的tag
时间Sun May 14 11:18:15 2006
是Taq 不是Tag
taq类都没有proof reading 的功能
有proof reading功能的是pfu
但是pfu没有会在PCR产物末端加上A的特性
A要自己另外加上去
通常用taq类的话, 就是接上去後在定序确认啦
※ 引述《[email protected] (MIMIMOMO毛毛和我)》之铭言:
: 我是大学部菜鸟
: 因为前一阵子用plantium tag、Extag做PCR得到我的产物
: 与p-blue、PGEMT ligation
: 但是蓝白筛的结果白色菌落都没有得到insert
: 总共重复做了数十次依样没有结果
: 现在boss叫我用violet试试看(我的vector是PGEMT easy vector)
: 但是violet不是没有proof reading的功能吗
: 这样该如何做转殖
: 我有查过相关资讯,应该是如果insert有接近去後
: 得到定序结果
: 只有功能性的序列没有问题就可以转殖
: 但是要如何确定他哪些是功能性的序列
: 请教各位老手了~~
: 感恩喔
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