作者Bananafish (Season)
看板Biotech
标题[问题] 请问有没有人做过原生质体萃取的实验
时间Thu May 18 22:12:32 2006
看来应该是很简单的实验 却没有得到想要的结果
想庆问大家是不是步骤方面出了问题
我的步骤是
1.将番茄叶秤1g 剪成片段
2.酒精消毒 15sec 漂白水1/5 30min
3.放入dH2O
4.放入酵素溶液
配方为 pectinase 50mg cellulase 200mg
mannitol 0.6m ph 5.6
5.隔夜 or 5小时
6.用125号滤网过滤
7.100g离心 用0.6m mannitol悬浮 重复三次
8.镜检 可以看到蛮多 细胞碎片的 有栅状组织细胞
可是 却发现不到 protoplast 因为 protoplast都是圆的
找不到 ~~~
希望有高手能提供一下意见
不然我之後的 cell fusion 根本做不下去
应该很容易的东西 却搞不定 伤脑筋阿
拜托大家帮帮忙 orz
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人生恰似坐在前进中的回旋木马,目标彷佛近在咫尺,
却原来是怎样费劲都无法企及的,只有摔下来时的痛是最真实的。
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◆ From: 210.240.172.118
1F:推 shunze:我记得好像要做gradient的东西才能避免细胞因过度变化而破 05/19 13:22