作者aggaci (有气质的台客)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请教关於RT-PCR的几个问题
时间Tue May 23 00:57:24 2006
※ 引述《littlebu (LittleBU)》之铭言：
: 1. 我看Promega Oligo-dT的说明上写它是18个T的Primer
: 请问这种Oligo-dT跟自己请厂商合成18个T会有什麽差异？
: 会比较好用？还是没什麽差？
没差，我都请生工合oligo-dT
: 请问有LAB是请厂商合成18个T来用吗？
: 2. 请问抽完RNA後的吸光值质量都不错，结果转出cDNA没有成功
: 这样是代表mRNA占的比例太少？还是mRNA被破坏？还是其他可能原因？
: 因为还没有跑RNA GEL，所以都只能猜测
我猜是degradation或是你某种成分没加到，或没表现
: 3. 请问一般实验室转cDNA是取多少量的RNA? 我们是 2ug -> 20ul cDNA
: 请大家指点迷津，谢谢 TT
跟你差不多(我是total RNA)
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http://0rz.net/da0PG 我的相簿....
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165
※ 编辑: aggaci 来自: 140.114.100.165 (05/23 00:59)
1F：→ littlebu:我也是total RNA 2ug, 另外我是测GAPDH, 应该是有表现 05/23 14:28
2F：→ littlebu:我也以为没加到，再做一次还是一样...被嫌很讨债... 05/23 14:30
3F：→ littlebu:谢谢你的热心回答～ 05/23 14:31