作者stonegirl (Girls, be ambitious)
看板Biotech
标题[问题]cell要染PI跑cytoflow可以用PFA固定吗?
时间Thu May 25 01:21:57 2006
我的细胞会表现EGFP 因为我染PI(propidium iodide)想要看cell cycle
希望看得是有表现EGFP的细胞
我原本是照PI的protocol利用EtOH固定 结果跑flow时完全侦测不到EGFP
跟学长讨论的结论是可能酒精会影响EGFP表现
想问问各位前辈们 我要做PI染色可以用paraformaldehyde固定吗?
另外我想再问关於flow的问题
我们学校那台flow共有三个滤片 FL1 FL2 FL3
看EGFP是用FL1 我查了一下emission在508nm
看PI 用FL3 PI emission在620nm 但是PI + DNA 约在514nm
那这两个会不会影响到呢? 需不需要做互补?
很多问题.......麻烦大家了
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◆ From: 218.184.161.71
1F:推 haleywen:1.试试用pEGFP-f 2.fix:50%EtOH 20min 05/25 21:40