作者aggaci (有气质的台客)
看板Biotech
标题Re: 请问关於EMSA的问题
时间Fri May 26 18:24:18 2006
※ 引述《erised (除了我以外都很好)》之铭言:
: ※ 引述《aggaci (有气质的台客)》之铭言:
: : 请问你(你)们pre-binding时cold probe都是labeled probe的几倍?
: : 有无做过neagative control呢?
: : 之前一直做不出来 火大了,pre-binding给他来个200倍
: : 结果是什麽都竞争掉了,连neagative control都竞争掉了(一定不会binding的那组)
: 我试过10x和100x (molar ratio)
: 100x的效果就比较好
: 可以看到specific band被compete掉
: 另外我也有同时和mutant site contained probe的competition比较
: 结果即使用100x那个specific band也不会被compete掉
: 不过我没有用kit是用传统的isotope label的
: hot probe量只是大概估计 不是很精准的量
: 但是我的cold probe (wt和mut) 量是加入一样的
再请问您一下
请问您的mixture要loading时,有加dye吗?
因为我不只在一个地方看到不加dye loading
於另一个well只加dye以便看跑到什麽地方...
为什麽呢?
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