作者spunka ()
看板Biotech
标题Re: [问题] 有人在做细菌的standard curve吗?
时间Sat May 27 15:56:15 2006
※ 引述《pooldodo (破渡渡)》之铭言:
: ※ 引述《spunka ()》之铭言:
: 无论你是否摇晃培养都注明就可以了
: 测量方法有很多种
: 2. 涂plate法,一样每半小时或一小时,取一定量菌液
: 涂plate,隔天计算菌落数,一只菌会长成一个菌落(均匀的话)
: 由於单位一般是使用 菌数/ml
: 但是你涂plate用 1ml 到最後可能会算到炸掉
: 所以自动减少量,最後换算时再乘回去
: 另外,一般使用这种方法最好稀释几次
: 就是取1ml到空试管,加入9ml medium,重复两三次
: 不然菌落太多算不完也长不下
E. coli的分裂一次只要20分钟
我目前是先挑single colony至3 ml的培养液 摇100rpm 37度 20小时
隔天以1:100稀释到比较大量的培养液 再次培养16小时(100rpm 37度)
16小时过後
打算至於冰上 做稀释(x 0.8x 0.6x 0.4x 0.2x)
然後再将上述的倍数以serial dilution的方法稀释後涂於plate上
培养一天之後 隔天数菌
目前我的问题是 第二次的培养 会不会造成细菌长太好而decline
因为我记得以前培养competent的菌 只要狂摇2hr就可以开始做了...
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