作者indie (band of brothers)
看板Biotech
标题Re: 请问关於EMSA的问题
时间Sun May 28 23:25:20 2006
※ 引述《aggaci (有气质的台客)》之铭言:
: ※ 引述《erised (除了我以外都很好)》之铭言:
: : 我试过10x和100x (molar ratio)
: : 100x的效果就比较好
: : 可以看到specific band被compete掉
: : 另外我也有同时和mutant site contained probe的competition比较
: : 结果即使用100x那个specific band也不会被compete掉
: : 不过我没有用kit是用传统的isotope label的
: : hot probe量只是大概估计 不是很精准的量
: : 但是我的cold probe (wt和mut) 量是加入一样的
: 再请问您一下
: 请问您的mixture要loading时,有加dye吗?
: 因为我不只在一个地方看到不加dye loading
: 於另一个well只加dye以便看跑到什麽地方...
: 为什麽呢?
我最近跑的感觉是加了dye以後
protein会沉淀 并且卡在well里面 (可以看到明显的particle)
所以有在考虑不加dye loading
可是我很怀疑 不加dye loading
DNA会不会沉不下去?
我用的是polyacrylamide 的胶 (直立式电泳槽)
不知道有没有先进有load过不加dye的DNA呢??
可以跑吗?
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