作者eriel (橘子数)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问组织冷冻切片怎麽做呢....?
时间Wed Jun 7 22:45:00 2006
以前有一个古道热肠的学长曾经教过我,切起来很漂亮,但是很麻烦
材料:OCT(最好是樱花牌的)、铝箔纸、麦克笔、CPU上面的不要的散热铝座、乾冰
方法:先将铝箔纸剪成长条状不需太宽,大概0.5-0.9公分,围着麦克笔杆,
然後贴起来成为一个空洞圆圈。样本若是含水量很多的如脑组织,先以蔗糖序列脱水後
再擦乾,然後覆盖保鲜膜,冻於-20C,两小时後再冻到-80C,两到四小时後取出
取出前先用乾冰将铝座降温,此时铝座会发出尖叫声,等声音停止後就达到低温状态
乾冰贴附在铝座旁保持低温,然後挤出一点OCT在铝座上,趁尚未完全凝固前放上样本
此时可调整任意方位(看是要站要躺都行)方位调整好,OCT也凝固了,所以不用担心
样本会移位,再将铝箔圈圈套上,注入OCT直到覆盖样本,待OCT完全成为乳白色後
即可拔除样本,冻於-80C。
这样较传统方法的好处是,调整样本的角度方位都很容易,也不必担心注入OCT後会跑掉
此外乾冰的温度较液态氮高,比较不会让OCT快速凝固,切起来也比较不会裂开
缺点是乾冰不易保存,所以每次要包埋就要去买乾冰,而台南只有一个地方在卖乾冰
我有想过用网子把乾冰包起来进液态氮桶,结果掉在里面......
※ 引述《ooo2 (长的太帅不好.呵呵)》之铭言:
: 请教各位组织冷冻切片怎麽做呢....
: 拜托各位教导一下....
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◆ From: 140.116.144.170
1F:推 pj0611:推..看起来是个不错的方法 06/12 12:02