作者hal (Acer NB 使用中...)
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标题Re: [问题] 收cancer cell RNA sample 的两种方法？
时间Fri Jun 9 12:31:14 2006
※ 引述《picar (picar)》之铭言：
: 请问一下收culture cancer cell RNA的时候
: 是直把直接trizol加入dish里面然後再刮下来
: 还是先trysin下来之後再加trizol
: 我会问这个问题是因为
: 有的细胞处理之後会浮起来
: 我想收浮起来的细胞
: 如果直接加trizol的话，那吸medium的时候那此浮的cell就没收到了
: 可是我想到
: 其实trypsin对cell也是一种stress
: 在trysin的过程中(包含离心等)
: 会不会有一些transcription的变化使RNA level改变呢？
: 而直接加trizol的话就能固定当时的RNA量
: 但会有收不到浮起的cell的问题
: 请问大家都是怎麽收RNA的呢
: 谢谢
你可以把medium收到离心管...
去离心
先把dish里的cell先用trizol收
在用这个trizol在去收你离心下的细胞
这样应该都可以收了
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◆ From: 140.109.42.2
1F：推 picar:谢谢… 不过这样如何拿捏trizol的用量，15cm的dish是加３ml 06/09 14:09
2F：→ picar:那现在是２ml加dish １ml加离心後的cell？ 06/09 14:11
3F：推 hal:我可能是先3ml加dish再取出来加到离心管 06/10 01:28
4F：→ hal:你的方法也是可以的不过dish里的会不会溶不好就不知了 06/10 01:30
5F：推 mandible:3ml的trizol不会太多吗? 06/10 13:04