作者flywind1209 (阿飞)
看板Biotech
标题Re: [问题] IP的wash
时间Mon Jun 19 23:37:12 2006
※ 引述《rpmi1640 (=v=)》之铭言:
: ※ 引述《[email protected] (六百)》之铭言:
: : 加 normal serum 去 block?
: : 这是我第一个想到的
: 可是protein G bead非特异性bind的protein是指IP/WESTERN所要测的蛋白(细胞内的
: 一种蛋白) 而不是Antibody耶
: 用normal serum 去 block会不会把protein G bead 所有的Ab的接点都block掉
: 而无法抓我要的那个Ab-Ag complex 还是说适量(一点点)的加入还是可以的
当然不会啦 这位先生你会错意罗...
blocking後 再加新的beads就好啦..
这就是所谓的pre-clear...........
原则上 若还是会non-specific bindinig
可以提高wash次数 或提高salt conc..
再不行 就用RIPA吧 跟她拼了 哈哈..
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