作者wensing (潜力股)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请教各位先进E. coli表现与 SDS-page的 …
时间Wed Jun 21 16:22:56 2006
感谢分享!
: : 烦请各位先进指点一下!
: : 谢谢!
: 分享一下我的经验
: 表现蛋白的部份应该是都差不多
: 但是在跑胶时
: 我会先离心(把菌离下来)
: 然後加8M urea去破菌
我的蛋白质很特别,可以耐得住urea而不变性
那用Gu-HCl可以吗? 会影电泳结果吗?
: (回溶菌泥後有可能澄清也有可能浑浊 视菌量而定)
: 加热到90度 10至20分钟 跑胶
: 可以看出有没有表现
: 但是不能知道是否是inclusion body
: 白白的东西应该是菌的残骸
: 你sample buffer中有什麽成分?
我的sample buffer 就一般的成分,SDS, β-me
: 如果只是SDS应该不足以完全破坏inclusion body
: (上面这句话是我据经验推测 有错请纠正 感谢~~^^")
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