作者aggaci (有气质的台客)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请教各位先进E. coli表现与 SDS-page的 …
时间Wed Jun 21 22:57:16 2006
※ 引述《wensing (潜力股)》之铭言：
: 感谢分享！
: : 分享一下我的经验
: : 表现蛋白的部份应该是都差不多
: : 但是在跑胶时
: : 我会先离心(把菌离下来)
: : 然後加8M urea去破菌
: 我的蛋白质很特别，可以耐得住urea而不变性
: 那用Gu-HCl可以吗？ 会影电泳结果吗？
用G-HCl时，跑电泳前得先沉淀
否则不能跑
: : (回溶菌泥後有可能澄清也有可能浑浊 视菌量而定)
: : 加热到90度 10至20分钟 跑胶
: : 可以看出有没有表现
: : 但是不能知道是否是inclusion body
: : 白白的东西应该是菌的残骸
: : 你sample buffer中有什麽成分?
: 我的sample buffer 就一般的成分，SDS, β-me
: : 如果只是SDS应该不足以完全破坏inclusion body
: : (上面这句话是我据经验推测 有错请纠正 感谢~~^^")
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