看板Biotech
标 题[问题] 蛋白质表现相关问题~~
发信站批踢踢参 (Fri Jun 30 17:13:27 2006)
转信站ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ptt3
这是我第一次做蛋白质表现...
我的是带有his-tag的蛋白质...於E. coli中表现...
用Ni-NTA进行纯化...
目前的问题是...我怀疑是因为表现量太高...所以我的蛋白在pellet的部分...
就我所知, 透过调整培养条件等等...可以将pellet的蛋白变成在supernatant中...
我之前的条件...37度, 0.5 mM IPTG, 6小时
我在想...将温度改成30度...减少IPTG的量...不过不知道该减少到多少...
induction的时间是否需要调整...
因此想请教有相关经验的大大~~能否提供一些经验分享~~
...另外想问我的观念是否正确...
之所以可以将pellet中的蛋白变到supernatant中...
主要是因为透过培养条件的调整, 使蛋白的表现量下降...
这样的观念对吗??
先谢过~~:)
--
※ 发信站: 批踢踢参(ptt3.cc)
◆ From: 128.211.176.226