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标 题Re: [问题] western的抗体用量问题
发信站清华生命科学 BBS (Sun Jul 9 15:54:45 2006)
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其实未必有那麽单纯
换一个方法举例
同样用1uL 抗体 稀释两千倍成2mL 或五千倍成 5mL
两种染出来的结果可能不会有很大差异
(当然也可能确实有很大差异 重点是 很多因素会影响结果)
因为抗体跟抗原的结合力其实满强的
你可以"想像":
被 western membrane 上的 specific band "抓到"的抗体就不会再掉下来了
因此你不管是 1uL of Ab 稀释成 2mL 还 5mL
在反应到一个程度以後
不是 "所有能跟抗体 binding 的蛋白质都被 bind 上"
就是 "所有能 bind 特定蛋白质的抗体都 bind 上去了"
结果大约是差不了太多
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另一个比喻
把十颗绿豆大小的铁珠跟 A.90颗真的绿豆 或 B.490颗真的绿豆 混起来
然後用强力磁铁去噜阿噜的
只要噜得够久 磁铁够强
不管A组还B组 十颗铁珠大概都会被吸上去
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莫非定律:
到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上
补充定律:
拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ym71010.ym.edu.tw
1F:推 Bluecold:了解了 谢谢 07/09 15:55