作者cetuspower (cetus)
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标题Re: [问题] 制作SDS-PAGE时会漏胶
时间Mon Jul 10 00:58:40 2006
※ 引述《Bluecold (黑特版比就可版好笑)》之铭言:
: 有没有考虑用最原始的方法?
: 看了版友们的回文
: 发现大家都是用铸胶模
: 所以都会有型号的问题产生
: 况且有些海绵啊 胶垫啊 好像过一段时间就会坏掉的样子
: 我老板因为觉得铸胶模不好用
: 所以我们实验室都用比较克难的方法
: 提供给你参考一下
: 首先把spacer跟两片玻璃摆好 然後下面贴胶带
: 胶带要贴在玻璃上 贴的紮实一点
: 相同的 spacer的两侧也要贴 一样也是贴的紮实一点
: 注意胶带要用宽的那一种 不要用细的
: 全部贴完以後 用长尾夹夹起来
: 摆个一个小时以上 让胶带上面的有机溶剂挥发
: 这样水才不会破坏胶带的黏性
: 这样一来应该是不会漏
: 我现在这样做胶 load进去多少就凝固多少
: 上面用水去压会比较快凝固
: 如果真的担心会漏的话
: 那麽胶带就只黏下面就好 然後用浓度低的agarose
: 大概load个300-200ul 让agarose均匀的分布在底部
: 这样就可以了 不过这样一来的话
: 可能会有一些agarose渗到spacer 跟 玻璃的中间
: 造成有些well可能会渗
: 如果用卡马西 blue染的话就没有什麽差
: 但是要是做western的话 可能就会影响到
: 如果上述的方法都还是会漏的话
: 那麽还有几招 我老板教的......
: 1. 改运吧 可能是八字太轻 会做不出来
: 要不然就......
: 2. 拿着你的pipetman 用20P的就好了
: 装满着TEMED 看到哪里漏就给他滴下去.....
: 老板说这是不传密技 请各位别声张出去 拜托XD
: 他上个礼拜教我的 我用过一次 真是好用
我的做法...꜊
两片玻片放入适当ㄉ封口袋
用封口机封好呈全部密封状态
再把要放牙齿处剪开
前後在各放一片玻璃
前面一定要较短的那一片(这样比较好插牙齿)
再用夹子把4片玻璃夹住立起来
封口袋多余的部份可夹在玻璃内
如此做连胶台胶条都不用
就可轻松做胶不会漏....
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 124.8.22.228
1F:→ cetuspower:把玻璃放入适当的封口袋中..... 07/10 00:59
2F:推 Bluecold:对不起 真的好难懂! 07/10 19:28