> 我DNA都存在-40度喔 > 不过如果你们实验室没有这样的冷冻柜就没办法了 -40吗 我问问看老师有没有 > 只能说 赶快用掉吧 > 至於你的PCR.. > 你没说你不同条件是哪里不同耶? 条件是因为另一组引子长度跟GC%不同 所以PCR才换条件 这2组引子做出来都没有nonspecific band annealing temp 是49度左右 > 通常越亮表示产物越多 > 产物越多 表示链合反应条件比较不严苛 > (通常是温度比较低) > 或是cycle数比较多 > 如果同样条件 作不同重复 而有你所说的那个情形 > 很有可能是DNA degrad了 用第一组引子PCR之後,第一次很亮,第二次1/10,第三次...就看不到了 这时我也以为cDNA degrade 但是用这一管cDNA (认为应该degrade光) 用另一对引子: 第一次有band 且很亮 但是用这一对再做第二次第三次...看不见了 = = > 不管怎样 你最好先做个小实验 > 一部分一部分确定 看是哪个环节有问题 > 就是所有条件都固定 只有一个变因 慢慢试 -- 生命 就该浪费在美好的食物上... -- ╭─ Origin ─╗ 新绿园 bbs.sa.ncyu.edu.tw ～ κλμ ─┤ ├ Author ╡ 218-171-52-176.dynamic.hinet.net