作者threestars (等待)
看板Biotech
标题Re: [问题] western blot 压片的问题..
时间Thu Jul 20 19:23:05 2006
※ 引述《linker0726 (试着独立)》之铭言：
: 今天压片子的时候，perk的讯号很强..压了5秒就很黑了
: 但是erk的压了20分钟完全没有东西...
: 请问是哪里出错了....之前有成功压出来过...
: erk的浓度是1:1000...
: 感谢
最近一直在押 ERK
你问的是protein的ERK1/2 还是phospho-ERK
ERK量比较少本来是要压久一点 但20分钟好像太久了
你的ECL有稀释吗？
ERK 1：1000算满浓的 如果还出不来 你可能要检查一下是不是1抗或2抗坏掉
抗体加入blocking buffer时 buffer温度太高也不行
如果是phospho-ERK 又比ERK弱
我之前ERK和phospho-ERK 都用Santa Cruz
ERK还OK phospho-ERK有够糟糕 压了两个月 看的到band
但杂band一堆 要不就是背景直很脏
就像之前版友讲的 一样状况 圣诞牌很糟糕
跟老板讲又不太相信 一直叫我试条件
直到有其他老师跟他讲说圣诞牌的会这样他才相信
（好像是跟抗体不同批号有时候会出现特好或特坏的状况）
最近换cell signaling 一下就出来拉 漂漂亮亮
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如果活在世上只是扮演着大家所期望的自己
那扮演好了又怎样
不如静静的让自己消失吧
总是多余的存在只是种荒谬的错误
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