作者pooldodo (破渡渡)
看板Biotech
标题Re: [问题]菌种的保存
时间Sat Jul 29 16:27:09 2006
菌种保存的方法有很多
因为你只有在做 E.coli,几乎所有的方法都可以
但是不代表一种方法可以适用到全部的菌种
我也会建议你持续培养直到确定冻菌可以重新活化为只比较安全
存菌的方法常用的有几种
离部份指数期的菌
利用80%甘油混合新鲜 medium
使 final 甘油浓度为 40%
然後冻到 -70 or 液态氮
如果是细胞需要使用渐冻,细菌一般没什麽影响
可以直接冻下去试试看,不行也可尝试渐冻
另外一种就是直接离心菌体
将上清液尽量的抽乾,直接冰 -70
我有很多真细菌都这样摆了很长的时间还是 ok
有些加了甘油会死亡的菌也可以尝试这种方法
最後就是使用冷冻乾燥
菌种中心一般也会有使用冷冻乾燥的菌
只是他们会利用专用的玻璃管来存菌,并且将管口封死
要使用时再将玻璃敲破
如果没有这种设备可以直接放在 1.5ml 离心管中即可
不过还是建议在确定冻菌方法可行之前
要留一些菌持续的培养
否则有些菌经过冻菌会造成特性的改变
我有遇过冻菌解冻後细菌色素不生产
或是会把质体抛弃的
所以,请小心...... Q__Q
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