作者aggaci (Desperado)
看板Biotech
标题Re: [问题] western blotting 的问题
时间Sun Jul 30 23:11:52 2006
※ 引述《Dokken (LYncH-MoD)》之铭言:
: 请教版上各位
: 我最近2个礼拜来作western出了点问题
: 就是每次压完片後 都一片空白 看不到band
: 我用1抗体的浓度是1:1000 而2抗是1:2000
: 整个操作大约是
: transfer 400mA 3.5hrs (gel上的marker看起来是有过去)
: blocking 4'C overnite
: 1' Ab 3hrs -> 2'Ab 1hrs
: 这样的话 可能出现的问题有那些
: 除了抗体浓度太低之外
: 还有什麽可能的小细节我没注意而产生这种情形呢
: 请各位指点一下 3Q
你用什麽抗体? 样品是什麽? 有无positive control?
压片压多久?二抗确定用对吗?
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