作者smallsum (天空)
看板Biotech
标题Re: [问题] 蛋白质表现的问题
时间Thu Aug 3 16:44:24 2006
※ 引述《aggaci (Desperado)》之铭言：
: ※ 引述《smallsum (天空)》之铭言：
: : 我在蛋白质表现时
: : 使用double digest切我片段及vector
: : DNA定序回来时
: : 我的序列也是完全正确的
: : 但在VECTOR上的His tag序列却消失了
: : 但在使用IPTG诱导时
: : 也能诱导出我的蛋白质
: : 可是却无法使His tag的column
: : 我使用的Vector为pET28b
: : 酵素为NdeI及ExoRI
: : 请各位高手帮我回答一下吧
: 28b应该是前後都有His tag
: 你是如何判断His-tag不见了?是抓不住的关系吗?
: 抓不住通常是Hsi-tag被挡到的关系
: 不太可能消失
我是经由定序回来会发现His tag序列都不见了
但我能原本的pET 28b直接去定序
都能找到His tag的序列
所以才会觉得很奇怪
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