作者nicknn8 (晴天晴天我要有情天)
看板Biotech
标题Re: [问题] western blot 压片的问题..
时间Fri Aug 4 12:02:38 2006
※ 引述《threestars (等待)》之铭言：
: ※ 引述《linker0726 (试着独立)》之铭言：
: : 今天压片子的时候，perk的讯号很强..压了5秒就很黑了
: : 但是erk的压了20分钟完全没有东西...
: : 请问是哪里出错了....之前有成功压出来过...
: : erk的浓度是1:1000...
: : 感谢
: 最近一直在押 ERK
: 你问的是protein的ERK1/2 还是phospho-ERK
: ERK量比较少本来是要压久一点 但20分钟好像太久了
: 你的ECL有稀释吗？
: ERK 1：1000算满浓的 如果还出不来 你可能要检查一下是不是1抗或2抗坏掉
: 抗体加入blocking buffer时 buffer温度太高也不行
: 如果是phospho-ERK 又比ERK弱
: 我之前ERK和phospho-ERK 都用Santa Cruz
: ERK还OK phospho-ERK有够糟糕 压了两个月 看的到band
: 但杂band一堆 要不就是背景直很脏
: 就像之前版友讲的 一样状况 圣诞牌很糟糕
: 跟老板讲又不太相信 一直叫我试条件
: 直到有其他老师跟他讲说圣诞牌的会这样他才相信
: （好像是跟抗体不同批号有时候会出现特好或特坏的状况）
: 最近换cell signaling 一下就出来拉 漂漂亮亮
请问你说的CELL SIGNALING 是厂牌名称吗 ??谢谢
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◆ From: 140.112.137.69
1F：推 ZecAhau:Yes~(抱歉未经原po同意就先回答了) 08/04 20:29