作者skenny (Chord7#)
看板Biotech
标题Re: [问题] western中transfer的问题
时间Sun Aug 20 16:23:00 2006
※ 引述《CsmuKoji (hiphop MUSIC  )》之铭言：
: 最近western都做不太出来
: 自己查了很多protocol
: 发现很多protocol都说
: transfer buffer里面要加SDS和methanol
我们家好像只有..20% methanol、10% 10x running buffer、70% ddH2O
SDS？ 应该不需要吧
: 请问它们的功用是什麽呢?
: 还有protocol中说要加搅拌子
: 可是我们lab好像都没有耶
: 都是湿式然後整个拿到冰箱里去transfer
: 请问有没有加stir bar结果会差很多吗?
: 先谢谢各位同学的帮忙了 ^_^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.30
1F：推 blence:你忽略了running buffer里头组成的成分了 08/20 16:30
2F：推 skenny:噢对後！ 08/20 21:06
3F：推 CsmuKoji:那如果甲醇跟SDS没加 会差很多吗 08/20 23:30
4F：推 cutebetty:差很多 没有SDS transfer效率会很差 没methanol的话 08/23 11:23
5F：→ cutebetty:则是不容易将蛋白固定在膜上 大分子蛋白比较没关系 08/23 11:23
6F：→ cutebetty:小分子蛋白则影响很大 我的实验经验.....(忘了加的结果) 08/23 11:25
7F：推 s73121:没记错的话若是小分子SDS最好不要加.SDS会帮助大分子bind在 08/25 09:27
8F：→ s73121:membrane上..应该是这样吧 08/25 09:28