作者EsMirada (esmirada)
看板Biotech
标题Re: [问题]SDS PAGE的stacking gel原理
时间Sun Aug 27 14:46:49 2006
※ 引述《madaycheer (peace)》之铭言:
: 我被学长问了一个问题
: 他问:为什麽SDS PAGE的stacking gel可以使sample压成一条线?
: 为什麽?为什麽?为什麽?> <
electrode buffer里头的glycine(pI~6.0)在stacking gel(pH~6.8)呈现中性带负电
跑在sample的最後面..而Cl-因为极大的charge to mass跑在sample的最前面
两者一前一後形成leading and trailing ion fronts
此时sample为了维持相同的电流(我们观察到的电流是连续的)
就会快速地向前追赶Cl-...形成一个堆挤的动作
等到这三者进入running gel(pH~9.2)後..glycine因为负电增加
跑到sample前面..此时同样为了维持相同的电流量
sample突然变慢..加上running gel里头acrylamide的浓度较高
所以gel pores较紧密也会对sample造成阻挡的现象
所以就好像紧急煞车一样sample就被压挤成了一条线
里头结合了许多基础学问..例如欧姆定律..泳动率等等
可以自己再仔细深入!
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◆ From: 222.156.11.129
1F:推 machin: n年後,刚好看到这偏回覆,大推XD 02/27 22:00